蛋白质工程中定点突变技术的原理及流程
通过多聚酶链式反应（pcr）等方法向目的dna片段中引入所需变化（通常是有利的），包括碱基对的增添、缺失和替换等。定点突变能迅速，高效地改变dna所表达的目的蛋白，从而影响生物性状，是基因研究工作中一种非常有用的手段。
定点突变需要设计特定的突变引物。引物长度一般为25-45 bp，建议选择30-35bp长度的引物p。引物至少要11-12个bp才能与模板搭上，而这种突变pcr要求引物两边都能与模板搭上，所以引物的两边各设至少12个bp。
定点突变实验注意事项
1、引物设计时须参照引物设计原则，注意引物中的gc含量，引物长度等，可在引物的两端选择g或者c，可以提高引物和模板结合的概率。
2、pcr过程中未得到相应大小条带或条带不单一，应适当调整退火温度，已调整聚合酶和引物的特异性。
3、使用一轮pcr产物进行第二轮pcr时，需等量加入作为模板的pcr产物的mol量。
4、某些特殊的限制性酶切酶处理基因时需要进行65℃灭酶处理（如i-ceui,pi-scei），以使内切酶变性和dna分离。
5、连接后转化，注意载体中的抗性基因，可以设置空白对照，已转化后得到的单菌落数量评估获取阳性克隆的概率。
答：（二）、定点突变技术 通过删除或置换dna片段中的核苷酸，使基因发生改变，从而产生新的蛋白质。改变dna核苷酸序列的几种方法：1.基因的化学合成 2.基因直接修饰法 3.盒式突变技术 三、蛋白质工程的应用示例 （一）、蛋白质...
答：采用重叠引物pcr介导的定点突变实验是一种快速有效的在基因中特定位点引入特定突变的有效技术。该技术采用具有互补末端的引物，使pcr产物形成了重叠链, 从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接...
答：说明该酶具有专一性或特异性性． （4）①定点突变技术可以用于研究某些氨基酸残基对蛋白质结构的影响，①正确； ②定点突变技术可以用于获得符合人们需要的蛋白药物、基因工程酶，②正确； ③定点突变技术可以用于修饰基因...
答：一旦目标dna明确以后，就可以运用定位突变等技术来进行研究。定位突变蛋白质中的氨基酸是由基因中的三联密码决定的，只要改变其中的一个或两个就可以改变氨基酸。通常是改变某个位置的氨基酸，研究蛋白质结构、稳定性或催化特性。
答：研究内容 蛋白质工程是在基因重组技术、生物化学、分子生物学、分子遗传学等学科的基础之上，融合了蛋白质晶体学、蛋白质动力学、蛋白质化学和计算机辅助设计等多学科而发展起来的新兴研究领域。其内容主要有两个方面：根据需要...
答：题目中的操作中科学家将β－干扰素基因进行定点突变，所以用的不是天然β干扰素，而是经过人工改造的，因而整个过程利用的生物技术为蛋白质工程。基因工程是通过对基因的操作，将符合人们需要的目的基因导入适宜的生物体，蛋白质...
答：酶分子定向进化:模拟自然进化过程（随机突变和自然选择）在体外进行酶基因的人工随机突变，建立突变基因文库，在人工控制条件的特殊环境下，定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。筛选方法：平板筛选法，荧光筛选法...
答：（1）由以上分析可知：该图示过程体现了基因工程、蛋白质工程、细胞工程、pcr技术等现代生物技术的综合运用．（2）pcr技术是当前基因工程中扩增目的基因常用的方法，图中ⅱ→ⅴ过程（ⅱ为高温变性过程；ⅲ是低温复性过程；ⅳ→...
答：基因工程是直接改变动物的基因，蛋白质工程是根据所需要的蛋白质来反推对应的所需基因，然后对基因进行改造。由此可以知道这两个工程都是要改变基因，基因是可以进行遗传的，所以两者的变异都是可遗传变异。
答：基因工程。蛋白质工程中氨基酸置换改造，就是利用基因工程的原理，包括基因的定点突变和基因表达对蛋白质进行改造，以期获得性质和功能更加完善的蛋白质分子。
18633004091&&定点突变的基本原理是什么 - 》》》 定点突变是指通过聚合酶链式反应(pcr)等方法向目的dna片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等.定点突变能迅速、高效的提高dna所表达的目的蛋白的...
18633004091&&蛋白质工程的原理是什么 》》》 所谓蛋白质工程,就是利用基因工程手段,包括基因的定点突变和基因表达对蛋白质进行改造,以期获得性质和功能更加完善的蛋白质分子.蛋白质是生命的体现者,离开...
18633004091&&请问蛋白质工程与基因突变的关系?先问一下基因工程本质是不是基因重组?(没产生新基因)其次,蛋白质工程中用到了 基因的定点诱变技术,那么它算是... - 》》》[答案] 1 是的 2 诱变不代表突变 但应该可以认为是一种非自然的基因突变 3 蛋白质工程是建立在基因工程的基础上的 最大不同处就在于蛋白质工程可以创造出自然界中没有的蛋白质 而 基因工程不行
18633004091&&蛋白质工程的基本原理 - 》》》 氨基酸的重组,蛋白质的分离纯化,蛋白质结构和功能的分析.
18633004091&&下列关于定点诱变技术的说法,正确的是( ) - 》》》[选项] a. 对任何蛋白质的改造都可以用定点诱变技术 b. 对已知空间结构的蛋白质可以用定点诱变技术 c. 定点诱变技术是蛋白质工程中必须用到的技术 d. 采用定点诱变技术通常可以改变蛋白质中多种氨基酸
18633004091&&何为定位突变技术?其方法有哪些?它对改造蛋白质特性有什么重要意义? - 》》》 意义:对某些天然蛋白质进行定位改造,还可以确定多肽链中某个氨基酸残基在蛋白质结构和动能上的作用,以收集有关氨基酸残基线性序列与空间构象及生物活性之间的对立关系,为设计制作新型的突变蛋白提供理论依据
18633004091&&关于蛋白质中基因的体外定向突变是 - 》》》 蛋白质工程通过基因操作修饰改变蛋白多肽的序列结构,产生生物功能更为优良的非天然蛋白变体(mutein).就是主要由人工突变基因而达到操纵蛋白质结构和性质的过程.重要步骤是体外分子定向进化吧.蛋白质工程的关键技术是基因体外的定向突变和定向进化,用的手段有局部随机掺入法,碱基定点转换法,部分片断合成法,引物定点引入法和pcr扩增突变法(这个重要,)还有易错pcr,交错延伸等,另外还有itche(渐增切割杂和酶)手法.我这些都是教科书上的,你可以去看一下我们学院张惠展教授写的《基因工程概论》(华东理工大学出版社).上面都有