细菌种类多、繁殖快、适应环境能力强,是自然界中分布最广泛的一群微小生物.在水、土壤、空气、食物、人和动物的体表以及与外界相通的腔道中,常有各种细菌和其它微生物存在.在自然界物质循环上起重要作用,不少是对人类有益的,对人致病的只是少数.微生物在自然界中的分布可概括为：“无孔不入,无处不有”. 第一节 土壤中的细菌 土壤是细菌生存的天然场所：含有大量的微生物.自然界中,以土壤的含菌量（种类）最多,土壤素有“天然培养基”之称.土壤也是一切自然环境中细菌的总发源地,也是人类利用细菌的主要来源.在肥沃的土壤中,每克土壤含菌量达几十亿-几仟亿（沙漠含菌量仅10万/g）. 土壤中的细菌来源：一是动物体,二是天然生活在土壤中的自养菌和 腐物寄生菌. 细菌在土壤各层分布不均：表面含菌量少；距表面10-20cm土壤含菌 量最多.土层越深,菌数越少. 土壤中的微生物以细菌为主,放线菌次之,另外还有真菌、螺旋体等绝在多数为非病原菌,对人和动植物是有益的,它们在自然界的物质循环中起着重要的作用,它们参与大自然的物质循环,分解动物的尸体和排泄物；固定大气中的氮,供给植物利用；土壤中可分离出许多能产生抗生素的微生物. 土壤中的微生物仅有少数病原菌,它们来自人和动物体（粪、尿、痰、尸体等）.进入土壤中的病原微生物容易死亡,但是一些抵抗力较强的球功及能形成芽胞的细菌如破伤风杆菌、气性坏疽病原菌、肉毒杆菌、炭疽杆菌等可在土壤中存活多年.因此土壤与创伤及战伤 的厌氧性感染有很大关系,应严防破伤风和气性坏疽感染. 第二节 空气中的细菌 一、空气中细菌来源 空气中的微生物分布的种类和数量因环境不同有所差别.空气中的微生物来源于人畜呼吸道的飞沫及地面飘扬起来的尘埃.尤其是动物周围、人口密集的公共场所,医院病房、门诊等处,容易受到带菌者和病人污染如飞沫、皮屑、痰液、脓汗和粪便等携带大量的微生物,可严重污染空气某些医疗操作也会液成空气污染,如高速牙钻修补或超声波清洁牙石时,可产生微生物气溶胶；穿衣、铺床时使织物表面微生物飞扬到空气中,清扫及人员走动尘土飞场也是医院空气中微生物的来源. 二、空气中的病原菌及空气感染 空气中因缺乏营养物及适当的温度和常因阳光照射和干燥作用而被消灭.只有抵抗力较强的细菌和真菌或细菌芽胞才能存留较长时间.室外空气中常见产芽胞杆菌、产色素细菌及真菌孢子等；室内空气中的微生物比室外多,室内空气中常见的病原菌有脑膜炎奈瑟氏菌、结核杆菌、溶血性球菌、白喉杆菌、百日咳杆菌等.空气中微生物污染程度与医院感染率有一定的关系.空气细菌卫生检查有时用甲型溶血性链球菌作为指示菌,表明空气受到人上呼吸道分泌物中微生物的污染程度. 在疫区或患者周围空气中有大量病原菌.如乳牛的唾液沫（结核）随咳嗽或喷啑可喷射5m远,且飘浮很长时间.带有病原菌的尘埃也会飞扬到大中. 空气中非病原菌常常污染药物制剂、培养基、生物制剂（品）,引起食品、饲料变质以及造成手术感染.所以在外科手术、细菌接种、制备生物药剂及生物制品等工作中,应严格无菌操作杜绝污染. 三、空气消毒法 1、紫外线照射：在工作前照射0.5-1h,停照后0.5h方可入内工作. 2、化学喷雾：用3-5%来苏儿或石碳酸（酚）或2%乳酸叶雾. 3、化学药物熏蒸：kmno4 福尔马林按1：2混合熏蒸：1000m3用250g （高) 500ml(福)→熏蒸24h；1-2ml乳酸/㎡熏蒸 第三 节水中的细菌 一、水中细菌来源 水也是微生物存在的天然环境,水中的细菌来自土壤、尘埃、空气、人畜排泄物及垃圾、工厂和生活污染水等. 二、水中的病原菌 水中微生物种类及数量因水源不同而异.一般地面水比地下水含菌数量多,并易被病原菌污染.水中的病原菌如伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、钩端螺旋体等主要来自人和动物的粪便及污染物.因此,粪便管理在控制和消灭消化道传染病有重要意义. 三、水的自洁作用 在自然界中,水源虽不断受到污染,但也经常地进行着自净作用. 1、水中泥沙沉降作用； 2、水面日光紫外线照射； 3、水中有机物分解营养物耗尽； 4、水中生物拮抗作用； 5、水中噬菌体灭菌作用； 6、原生生物吞(藻类和噬菌)噬作用； 7、水源清洁支流冲淡作用. 四、水的细菌学检查 水的细菌学检查,是水质卫生评定的中心环节.因为水源,在传染病的发生、流行及对人畜健康的威胁上均占有重要的作用,水质污染常常可引起消化道传染病的暴发流行.因此,必须对水源进行微生物学（细菌学）检查.但直接检查水中的病原菌是比较困难的.水的微生物学检查,以大肠杆菌为指标. 水的微生物学检查常用测定细菌总数和大肠杆菌菌群数来判断水的污染程度,目前我国规定生活饮用水的标准为（水质细菌学检查三项指标）： ①菌总数：1m1水中各种细菌总数不超过100个. ②大肠杆菌价：检测出1个大肠杆菌的最小水量不超过300 m1. ③大肠杆指数：每1000 m1水中大肠菌群数不超过3个. 第四节细菌在动物体的分布 一、人体正常菌群的分布的分布（见表） 部 位 常 见 菌 种 皮肤 表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、绿脓杆菌、耻垢杆菌等 口腔 链球菌（甲型或乙型）、乳酸杆菌、螺旋体、梭形杆菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、类白喉杆菌等 胃 正常一般无菌 肠道 类杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、厌氧性链球菌、粪链球菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸杆菌、变形杆菌、破伤风杆菌、产气荚膜杆菌等 鼻咽腔 甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等 眼结膜 皮表葡萄球菌、结膜干燥杆菌、类白喉杆菌等 阴道 乳酸杆菌、白色念球菌、类白喉杆菌、大肠杆菌等 尿道 表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、耻垢杆菌等 二、正常菌群的概念 人和动物自出生后,外界的微生物就逐渐进入机体.在正常人和动物皮肤、粘膜及外界相通的各种控道（如口腔、鼻咽腔、肠道和泌尿道）等部位,存在着对机体无害且有益和必需的微生物群,包括细菌、真菌、螺旋体、支原体等.它们在与宿主的长期进化过程中,微生物群的内部及其与宿主之间互相依存、互相制约,形成一个能进行物质、能量及基因交流的动态平衡的生态系统习惯称之为正常菌群（normal flora）.正常菌群大部分是长期居留于机体又称为常居菌,也有少数微生物是暂时寄居的,称为过路菌. 三、正常菌群与机体的意义 正常菌群对机体的意义表现在三个方面：正常菌群对机体的有利作用；正常菌群转化为条件致病菌；菌群失调及菌群失调症. 1.正常菌群对机体的有利作用 ①促消化作用：降解食物残渣.肠道中正常菌群可互相配合,降解末 被机体消化食物残渣,将不溶必蛋白和糖类转化为可 溶性状态,便于机体进一步吸收. ②营养作用：有些微生物能合成维生素,如核黄素、生物素、叶酸、吡哆醇及维生素k等,供机体吸收利用.如大肠杆菌及乳链球菌能合成vitb1、b12泛酸、叶酸及vitc、k等,供机体利用；双岐杆菌产酸造成酸性环境可促进对vitd、ca、fe的吸收. ③生物拮抗作用：正常菌群通过粘附和繁殖能形成一层自然菌膜,是一种非特异性的保护膜,可促机体抵抗致病微生物的侵袭及定植,从而对宿主起到一定程度的保护作用.正常菌群除与病原菌争夺营养物质和空间位置外,还可以通过其代谢产物以及产生抗生素、细菌素等起作用.如大肠菌素可抑制痢疾杆菌生长；唾液链球菌产生的h2o2抑制脑膜炎球菌生长.可以说正常菌群是人体防止外袭菌侵入的生物屏障. ④免疫作用：微生物具有免疫原性、促分裂和佐剂的作用.可剌激机体免疫系统发育和成熟.如正常菌群释放的内毒素等物质可刺激机体免疫系统保持活跃状态,是非特异免疫功能的一个不可缺少的组成部分. 2、正常菌群转化为条件病原菌 正常菌群具有相对稳定性,但在特定条件下,正常菌群与机体之间的生态平衡可被破坏. 正常菌群转化为条件性致病的特定条件通常是： ①机体免疫机能低下：例如皮肤粘膜受伤（特别是大面积烧伤）、身 体受凉、过度疲劳、长期消耗性疾病等,可导致正常菌群的自身感 染. ②正常菌群寄居部位发生变迁：正常菌群发生定位转移也可引起疾 病.例如外伤,手术,留置导尿管等使大肠杆菌进入腹腔或泌尿 道,可引起腹膜炎、泌尿道感染. ③不适当的抗菌素药物治疗：如长期或滥用抗菌素治疗. 3、菌群失调及菌群失调症 菌群失调：在正常情况下,机体、正常菌群和环境三者之间,保持一 定的生态平衡.如果生态平衡发生改变,将导至体内某一 部位正常菌群中各种细菌的比例关系发生数量和质量上的 变化,这种生态体系表现出的不平衡状态,称菌群失调. 菌群失调的常见诱因主要是使用抗生素、同位素、激素、患有慢性消耗性疾病时肠道、呼吸道、泌尿生殖道的功能失常也是重要原因.去除诱因后一般可使菌群复常,也有长期失调难于逆转的情况. 菌群失调症：指严重的菌群失调使机体发生功能紊乱表现出明显临床 症状者.菌群失调症又叫菌群交替症（二次感染或二重 感染）. 临床上常见的菌群失调症有：①耐药性葡萄球菌繁殖成优势菌而发生腹泻,偶尔发生致死性葡萄球菌脓毒血症；②变形杆菌和假单胞菌生长旺盛并侵入组织发生肾炎或膀胱炎；③白色念珠菌大量繁殖,引起肠道、肛门或阴道感染,也可发展成全身感染；④艰难梭菌在结肠内大量繁殖,并产生一种肠毒素及细菌毒素,导致假膜性肠炎. 菌群失调经常发生而菌群失调症则少见.患二重感染的机体抵抗力很弱,细菌对抗菌素药物不敏感,治疗难度大,应严加预防,避免发生. 第五节畜产品中的细菌 一、乳汁中的细菌 健康动物乳汁中细菌数量和种类少.乳汁易被污染,其原因(来源）有：皮毛、容器工具、挤奶员卫生习惯及挤奶前的尘埃等.传染病和乳房炎病畜带金葡、rts、结核、布氏杆菌等. 肉（蛋）中的细菌:健康肉（蛋）无菌.但污染环节多.传染病肉含相应病原菌（尤其是沙门氏菌）. 第六节细菌在物质转化中的作用 蛋白质是动物生命的基础,cho是动物能量的来源. 有机物的彻底分解是微生物作用的结果. 任何生命现象,都是有机元素在物质循环中不断发展的结果.正是这一循环的不断发展,才使得自然界有限的营养物质变成了无穷无尽的来源可以说,假若地球上没有微生物,那么,其它生物的存在是不可思意的.
18158052191&&...(15分) 使用dna重组技术,把天然或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中,使之充分表达,经纯化后而制得的疫苗称... - 》》》[答案] (1)过程①是以rna为模板合成dna是逆转录.(2)大量获得基因的技术是pcr技术,pcr扩增dna需要引物,还需要dna... 用钙离子处理,得到感受态细胞,再将经过处理的细胞与溶有a基因重组表达载体的缓冲溶液混合,并控制在一定的温度使之...
18158052191&&用氯化钙处理细菌使目的基因进入到底是作用细胞壁,还是细胞膜?拜托各位大神 - 》》》 氯化钙处理细菌,是作用于细胞膜: 将快速生长的大肠杆菌置于经低温(0℃)预处理的低渗氯化钙溶液中,便会造成细胞膨胀,同时ca2 会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构,促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来,离开所在区域,诱导细胞成为感受态细胞; 此时,将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激(90s),细胞膜的液晶结构会发生剧烈扰动,并随机出现许多间隙,外源dna就可能被细胞吸收.
18158052191&&如图1为巨噬细胞炎症反应的新机制研究,巨噬细胞受细菌感染或细菌脂多糖 lps 刺激后,升高血管内皮生长因子受体3(vegfr - 3 )和信号分子vegf - ... - 》》》[答案] (1)细菌或细菌脂多糖lps在免疫学上相当于抗原,tlr4的本质是受体蛋白.(2)过度或持续性的tlr4活化引起过度炎症反应、败血症,在vegf-c 的刺激下,通过活化pi3k-akt1通路,促进tlp4内吞,从而抑制nf-κb活性,降...
18158052191&&如何用基因工程法将人体内产生的一种蛋白质在细菌体内表达 - 》》》 这个叫做“原核表达”.首先你要有原核表达用载体,然后你要有该蛋白对应的cdna序列,以此构建原核表达融合载体,最后将构建好的载体转入如bl21类的大肠杆菌菌株内,通过iptg的方法诱导表达就可以了.
18158052191&&如何利用crispri系统实现对微生物基因表达调控 - 》》》 如何利用crispri系统实现对微生物基因表达调控 以我们学校为例,微生物研究所主要研究方向有:应用微生物学方向:一是以农业害虫微生物防治的基础与应用研究为特色,主要包括高效杀虫杀螨真菌资源及其抗逆功能基因发掘,丝孢类生防真...
18158052191&&发现某种菌具有某种酶的活性,如果想通过大肠杆菌高效表达获得大量的这种酶,如何操作 - 》》》 先从这种菌中克隆出那种酶的基因(提rna,再反转录,再根据ncbi上已知的这种基因的序列设计引物,pcr扩增出目的基因). 如果上述引物上已经有酶切位点了,直接用酶切质粒,将目的基因连到质粒上,再用这个质粒去转化大肠杆菌感受态.将转化的大肠杆菌涂到加有抗生素的培养基上(抗生素种类依据质粒上所带有的抗性基因而定).鉴定培养基上长出的菌落,即可. 如果引物上没有酶切位点,还要再设计带有酶切位点的引物,扩增出基因,以下相同.
18158052191&&(基因工程)生物,基因工程的最后一步检测和表达 - 》》》 标记基因的作用在于便于检测目的基因的情况.因为标记基因和目的基因同位于运载体上,要导入都导入,要表达则都会表达.一般标记基因的dna序列是已知的,若选用抗氨苄青霉素基因,则可在目的基因导入后用氨苄青霉素来处理受体细胞,若无异常,则抗氨苄青霉素已合成,说明基因已得到表达.检测分三种,首先是通过对标记基因的检测,通常用dna分子杂交技术,来检验标记基因(目的基因)是否成功的导入受体细胞.或者用rna分子杂交技术,来看目的基因导入后是否成功转录出信使rna.最后可以用抗原-抗体检验,来验证导入基因是否成功表达.上例中氨苄青霉素的检验就属于本类
18158052191&&1、常规的高密度培养的措施有哪些?2、基因工程菌高表达的障碍是什么? - 》》》 高密度培养的具体方法:(1)选取最佳培养基成分和各成分含量.(2)补料,这是工程菌高密度培养的重要手段之一.(3)提高溶解氧的浓度,提高好氧菌和兼性厌氧菌培养时的溶氧量也是高密度培养的重要手段之一.(4)防止有害代谢产物的生成.
18158052191&&重组菌与传统微生物在产物表达上有什么区别 - 》》》 重组菌与传统微生物在产物表达上有什么区别? 1.应用aox启动子,转录效率高,易于诱发调控. 2.表达质粒易于整合到基因组,不易丢失,适用于高密度发酵,产量高. 3.表达产物分拣进入过氧化物酶体等,因此最近十几年来,人们越来越多的应用它作为外源基因表达的系统.
18158052191&&基因工程菌与传统微生物在产物表达上有何区别 - 》》》 一般基因工程菌都是为了大量表达某一产物或者是让某一原来表达的产物不在表达,这两种情况都会使基因所涉及到的产物的量发生改变,变多会变少,同时,如果这个物质是另一代谢途径的所需要的物质还可能会影响到这个途径产物的产量,代谢是个复杂的过程,改变一个基因影响的绝对不仅仅是一种物质的产量,许多物质都会发生改变,只是这个物质达到了你想要的量,你的目的就达到了